分光光度法農(nóng)藥殘留中磷含量的測(cè)定

摘要：本實(shí)驗(yàn)利用了分光光度法，測(cè)定五種蔬菜中磷總含量。將試樣中的有機(jī)物破壞，使磷游出來(lái)，在酸性溶液中，用礬鉬酸銨處理，在波長(zhǎng)660nm下進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，五種蔬菜中總磷在0～4.7949ug/g范圍，這五種樣品之間辣子中磷的含量zui多，香菜中磷的含量zui少。

前言：蔬菜與人們的日常生活密切相關(guān)，隨著生活水平的提高,人們開(kāi)始關(guān)注蔬菜的質(zhì)量問(wèn)題，其中農(nóng)藥殘留問(wèn)題也早已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn) 。由于有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)于防治蔬菜等的農(nóng)作物病蟲害具有經(jīng)濟(jì)、、方便等特點(diǎn)，所以有機(jī)磷農(nóng)藥長(zhǎng)期在農(nóng)藥中占有重要地位^[10]但不少有機(jī)磷農(nóng)藥在殺滅病蟲害的同時(shí)對(duì)人體也具有高毒性。隨著人們對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥及其殘留的認(rèn)識(shí)，對(duì)它進(jìn)行檢測(cè)的各種方法也就應(yīng)運(yùn)而生。

隨著農(nóng)藥品種日益增多，使用范圍不斷拓寬，加之人們對(duì)害物綜合治理不夠重視而導(dǎo)致農(nóng)藥的不合理不科學(xué)使用，農(nóng)藥的管理不規(guī)范不嚴(yán)格，zui終也危及到人類健康和生態(tài)平衡。農(nóng)藥殘留給食品帶來(lái)的影響己受到普遍重視。

各地在防治病蟲害中,大量使用化學(xué)農(nóng)藥。由于大量持續(xù)的使用化學(xué)農(nóng)藥,使得蔬菜病蟲對(duì)化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生抗藥性,所以只能加大農(nóng)藥的使用量,農(nóng)藥使用和依賴程度呈現(xiàn)出惡性循環(huán)。農(nóng)藥的大量使用,使得蔬菜中農(nóng)藥殘留量超標(biāo)問(wèn)題突出。 

Indeed, feeling easily fatigued, weak and having a decreased attention span can be symptoms of mild phosphate deficiency.事實(shí)上，人體內(nèi)70-80%的磷沉積于骨骼中,其余大部份構(gòu)成軟組織成分,只有一小部分存在于體液中.血液中的磷以無(wú)機(jī)磷或有機(jī)磷兩種形式存在,磷在體內(nèi)的生理功能主要是參與糖,脂類及氨基酸的代謝,轉(zhuǎn)運(yùn)能量,調(diào)節(jié)酸堿平衡,并參與骨骼和牙齒的組成.。磷的含量增高,鈣,鎂的含量就降低，會(huì)引起低血鈣癥，從而導(dǎo)致神經(jīng)興奮性增強(qiáng)。含磷過(guò)高,鈣,磷比失調(diào)時(shí)易患佝僂病,降低肌體免疫功能。將導(dǎo)致高磷血癥,因體內(nèi)過(guò)高的磷會(huì)造成鈣質(zhì)的流失, 以骨質(zhì)疏松易碎、牙齒蛀蝕、各種鈣缺乏癥狀日益明顯、精神不振甚至崩潰，破壞其他礦物質(zhì)平衡等方面表現(xiàn)。

1.實(shí)驗(yàn)部分

1.1  實(shí)驗(yàn)樣品：菠菜，辣子，青菜，香菜，白菜

1.2實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

1.2.1試劑

濃硝酸、鹽酸、2%抗壞血酸、SnCl₂、鹽酸-鉬酸銨、磷酸二氫鉀 。

1.2.2實(shí)驗(yàn)儀器

V-1300型可見(jiàn)分光光度計(jì)、電子天平、烘干箱、酸度計(jì)、甘汞電極、高溫電熱爐。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1樣品采集 

從學(xué)校的市場(chǎng)買蔬菜作為采集材料。采集好的樣品洗了以后進(jìn)行干燥，然后裝入密封袋，貼好標(biāo)簽。

1.3.2樣品消解法的選擇 

    樣品消解的方法有兩種，濕法和干法。由于濕法消化耗時(shí)長(zhǎng)，而且容易造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。干法試劑用量少，產(chǎn)生的空白值較小，操作簡(jiǎn)單，管理方便，適宜于大批量樣品的分析測(cè)定。干法的優(yōu)點(diǎn)還有試樣量可以很大，且試劑的污染可以被減少到zui低程度，而這卻是濕法消化中所存在的嚴(yán)重題。

1.3.3干法處理   

把樣品裝到紙袋子里，放烘干箱2天，用研缽把樣品*粉碎，稱取樣品3g于坩堝中（準(zhǔn)確至0.0002g），在電爐上低溫炭化至無(wú)煙為止，再將其放入高溫爐于（550℃±20℃）下灼燒3h，取出冷卻，在坩堝中加入1:1鹽酸溶液10ml和濃硝酸數(shù)滴，小心煮沸約10min，將此溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，并用熱蒸餾水洗滌坩堝及漏斗中過(guò)濾，冷卻至室溫后定容，搖勻，為試樣分解液，待測(cè)。

1.3.4測(cè)定方法：分光光度法

1.3.5磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(P₂O₅，1.0mg/ml)。標(biāo)準(zhǔn)稱取在105℃干燥2小時(shí)的磷酸二氫鉀1.9175克，置于1000毫升容量瓶中，用水溶解稀至刻度，搖勻。

磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(P₂O₅，1.0mg/ml)　用移液管準(zhǔn)確取含P₂O₅，1.0mg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)液10.0毫升于100毫升容量瓶中,稀至刻度、搖勻。

2 .結(jié)果與分析

2.1zui大吸收波長(zhǎng)的選擇

（表1）zui大吸收波長(zhǎng)的選擇

zui大吸收波長(zhǎng)的選擇（圖1）        

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用吸量管分別吸取20ppm P₂O₅標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 毫升，置于5個(gè)25ml 比色管或容量瓶中，各加入5ml 蒸餾水，5滴2%抗壞血酸和2.5鹽酸-鉬酸銨（保持整個(gè)溶液體積在15ml以下），放置5分鐘后加入7滴0.5% SnCl₂  稀釋到刻度，搖勺，放置10min 后用1cm 比色皿在入=660nm 以蒸餾水做空白下，測(cè)其吸光度，繪制工作曲線。

表2 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度及吸光度

磷標(biāo)準(zhǔn)液的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖2）

我們更清楚的表示濃度和吸光度之間的關(guān)系，利用磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和吸光度繪制曲線，上面的表格和曲線可以看出，磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度越高，吸光度越高，吸光度和濃度的曾加成正比。

3 樣品測(cè)定

取試樣分解液1ml,液中加入5ml蒸餾水，再加入5滴抗壞血酸（2%），再加入2.5ml鹽酸-鉬酸銨（4%），放5分鐘后，再加入3滴SnCl₂ ，放10分鐘后，裝到分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為660nm下測(cè)定吸光度。

（表3） 白菜的吸光度與磷含量

（表4）青菜的吸光度與磷含量

（表5）菠菜的吸光度與磷含量

（表6）香菜的吸光度與磷含量

(表7)辣子的吸光度與磷含量

   各中蔬菜之間總磷含量比較（圖3）

圖3可見(jiàn)，利用分光光度法和利用計(jì)算機(jī)數(shù)字圖像法在檢測(cè)蔬菜中的磷含量時(shí), 檢測(cè)精度均可滿足需要。檢測(cè)結(jié)果顯示五種蔬菜樣品中,辣子中的磷的含量多，香菜中磷的含量較少.

4.結(jié)論

蔬菜與人們的日常生活密切相關(guān)，隨著生活水平的提高,人們開(kāi)始關(guān)注蔬菜的質(zhì)量問(wèn)題，其中農(nóng)藥殘留問(wèn)題也早已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn) 。

通過(guò)測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果表明在磷的zui大吸收波長(zhǎng)為660nm，在660nm處對(duì)上述的五中樣品進(jìn)行測(cè)定。白菜中微量元素磷的含量為4.2702（ug/ml）；青菜中微量元素磷的含量為4.4570g（ug/ml）；菠菜中微量元素磷的含量為3.1884（ug/ml）；香菜中微量元素磷的含量為2.7464（ug/ml）；辣子中微量元素磷的含量為4.7949（ug/ml）.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明有些蔬菜的磷的含量高一些，有些蔬菜中少一些，但是日常膳食中的磷不會(huì)對(duì)人體造成危害，只有過(guò)量攝入才能有毒性作用。所以日常生活中要注意調(diào)整消費(fèi)高含量磷的食品和低含量磷的食品。